白蛋白生產(chǎn)工藝
（Kistler-Nistchmann法分離白蛋白的工藝）
白蛋白Kistler-Nistchmann分離法是Chon法的改進方法，也是目前國際上常用的低溫乙醇血漿蛋白分離法。
根據(jù)Kistler-Nistchmann法制作人血白蛋白的工藝步驟如下：
上圖所示：
1、將混合血漿的溫度調(diào)至0±0.5℃。滴加預(yù)冷的95%的乙醇，邊加邊攪拌，使血漿中乙醇濃度達到8%，滴加完后繼續(xù)攪拌1小時，并使溫度逐漸下降至-2℃，再進行固液相分離，所得上清液為上清I。沉淀I主要成分為：纖維蛋白原、Ⅷ因子、冷不溶球蛋白（纖維結(jié)合蛋白）等。
2、將所需pH4.0醋酸緩沖液和95%乙醇一起滴入上清I中，使其pH調(diào)至5.80±0.05、乙醇濃度提高至19%。在滴加過程中，上清I的溫度應(yīng)迅速從-2℃降至-5℃左右。滴加完，在此溫度中繼續(xù)攪拌，然后進行固液相分離，所得沉淀A留待分離免疫球蛋白，所得上清A繼續(xù)分離。沉淀A（組分Ⅱ+Ⅲ）主要成分為：IgG、IgM、IgA、?球蛋白、凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ等。
3、量取上清容量后，在pH 5.80的條件下，滴加95%乙醇使其濃度達到40%，溫度由-5℃降至-7℃。滴加完后繼續(xù)攪拌2小時以上，然后進行固液相分離，得到上清Ⅳ。沉淀Ⅳ-4和Ⅳ主要成分為：廢棄雜蛋白部分（運鐵蛋白質(zhì)、ɑ-1脂蛋白及少量白蛋白。
4、在攪拌下滴加1M醋酸和乙醇混合物至已知容量的上清Ⅳ，調(diào)節(jié)pH至4.80±0.05，并保持其乙醇濃度不變。滴完后在-8℃下繼續(xù)攪拌8小時以上，然后進行固液相分離，收集沉淀為沉淀C（粗白蛋白）。
5、稱得沉淀C的重量后，用計算量的0℃無熱原蒸餾水溶解，使其溶解液中的乙醇濃度在10%。在0～-3℃條件下，攪拌1小時以上，待沉淀Ⅴ全部溶解，用澄清濾板過濾，以除去雜志。用0.5M碳酸鈉調(diào)節(jié)澄清后的白蛋白pH5.2-5.5。用 超濾去除乙醇。
6、校正蛋白濃度為20g/dl，加入辛酸鈉做保護劑，每克白蛋白為0.16mmol,10g/dl碳酸鈉調(diào)節(jié)pH至6.8±0.4.將此白蛋白液放在60℃水浴中，加熱10小時。取出后澄清過濾，然后在無菌室進行除菌過濾、分裝軋蓋。
7、將分裝后的白蛋白液放入30 ℃ 恒溫室內(nèi)保溫14天。對保溫后的白蛋白逐瓶進行燈檢，剔除澄清度不合格者，即可得到精制白蛋白。